Leica EM AFS2利用甲醇、丙酮等有机溶剂在低温条件下替代样品中所含水分，这通常是高压冷冻固定的后续步骤，或者对常规化学固定样品在低温下进行脱水及树脂渗透。树脂聚合硬化可在低温或常温下进行。