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单四极杆液质联用仪(生物兼容) UPLC-QDa

操作指南

一、流动相的配置

A:有机相

B:有机相

C:0.1%FA in water

D: 0.1%FA in CAN

Seal wash和purge溶剂:10%异丙醇/甲醇/乙腈(密封件清洗液,冲洗泵;清除溶剂,灌注样品注射器和进样流路)

Wash溶剂:90%乙腈(目的是清洗针的外壁,针的内壁在流路中不需要清洗)

注意:

①,水相使用时需要现配现用(避免长菌)自己使用大概2-3天更换一次;

②,瓶子上写清楚成分、日期、名字;

③,水相、有机相的瓶子可以定期更换使用,防止水相瓶子长菌;

④,使用之前水相的瓶子需要使用有机相润洗

⑤,AB相可自主更换溶剂

二、操作流程

1、检查

先检查流动相情况是否需要更换,再检查PDA与FIR内部线路是否连接正确,蓝色管路代表废液,检查仪器是否都处于打开状态(均有一个灯亮),接着打开QDA仪器按钮

2、Empower—配置系统—选择所需的系统上线

3、 新建课题组(若需要)

打开Empower软件登录—配置系统—左侧项目—右键新建—项目—下一步*2—勾选质谱QDa—下一步—选择任一方法—下一步—命名新的名称(项目注释任填)—完成

4、灌注与清洗

打开Empower软件登录—运行样品—左侧选择课题组,右侧选择系统(例如选择“UPLC-PDA-QDa” )—在界面左下方样品管理器FTN小框中点击右下角仪器小图标,打开液相仪器界面—QDa模块点击操作—四元溶剂管理器-控制-灌注溶剂-选择CD管路灌注5min—样品管理器FTN-控制-灌注15s,5次循环-完成后再次打开四元溶剂管理系统-灌注密封件清洗液-是-样品管理器-清洗针

5、样品运行

①清洗灌注完成后打开Empower软件—打开右下方仪器方法—若不需要修改直接点击设置—等待▲psi<30;(或者直接点击左上角“系统”-“控制”-“系统启动”-“勾选设置合适条件”-点击开始)

注意:若仪器发生报错,哪个模块发生报错就点击哪个模块,然后点击控制—重设**

②重新回到序列界面,正确填写样品序列信息,点击“运行”。例如输入1A1代表一号盘1号位

注意:先跑blank再跑标准品(浓度由低到高)

6、冲洗柱子

AB相分别放入纯水和纯甲醇,使用0.2ml/min流速,80%A冲5min,50%A冲5min,20%A冲5min,100%B冲5min

7.关机

四元溶剂管理系统—右侧停止流液—样品管理器不需操作—PDA点击右侧关闭灯—色谱柱管理器—点击温度弹出对话框输入0,两个都要设置—QDA点击右侧的操作按钮—所有模块均只有一盏灯亮—回收样品

8、修改方法

在样品运行界面的下面—仪器方法—编辑—另存方法(不能覆盖原方法)—依次编辑各模块—ACQ-QSM:密封清洗时间设为5min—ACQ-FTN:样品温度设为10℃,其余默认—ACQ-CM(柱子):色谱柱温度设为40℃—ACQ-PDA(紫外)210nm-400nm全扫;可设单通道与多通道—ACQ-QDA(质谱):质量数范围50-600道尔顿(极限1000道尔顿)正扫描模式:+H/Na(23)/K(39);负扫描模式:一般-H—SIR可设置只检测某一质量数物质;其余默认不需要管;—将方法用方法组保存!!否则系统无法读取!

注意:C18的柱子有机相的梯度设置应该由低到高;